A09.05.014 Определение соотношения белковых фракций методом электрофореза (Белковые фракции сыворотки крови методом капиллярного электрофореза)

Общий белок сыворотки крови состоит из смеси белков с разной структурой и функциями. Разделение на фракции основано на разной подвижности белков в разделяющей среде под действием электрического поля. Методом капиллярного электрофореза выделяют пять стандартных фракций: альбумин, альфа-1-, альфа-2-, бета- (иногда отдельно выделяют фракции бета-1- и бета-2-глобулинов) и гамма-глобулины.

Фракция альбуминов составляет 40-60% от общего количества белка (см. тест № 10). Основным компонентом фракции является альбумин. При капиллярном электрофорезе в данную фракцию попадают также альфа-липопротеины, пре-бета-липопротеины и бета-липопротеины.

Фракция альфа-1-глобулина включает в себя острофазные белки: альфа-1-антитрипсин (основной компонент этой фракции, ингибитор многих протеолитических ферментов: трипсина, химотрипсина, плазмина и т. п.), альфа-1-кислый гликопротеин (орозомукоид).

Фракция альфа-2-глобулинов включает высокомолекулярные преимущественно острофазные белки − альфа-2-макроглобулин, гаптоглобин, церулоплазмин. Основным компонентом фракции является альфа-2-макроглобулин – ингибитор протеиназ (в т. ч. ферментов систем кинина, комплемента, свертывания и фибринолиза), модулятор иммунных и воспалительных реакций.

Фракция бета-глобулинов содержит трансферрин (белок-переносчик железа), гемопексин (участвует в метаболизме железа, связывая гем при метаболизме гемсодержащих белков), С3 и С4 компоненты комплемента (участвуют в реакциях иммунитета), С-реактивный белок.

Фракция гамма-глобулинов состоит из иммуноглобулинов, функционально представляющих собой антитела, которые обеспечивают гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.

При каких состояниях может изменяться нормальное соотношение белковых фракций в сыворотке крови

Спектр состояний, при которых наблюдаются изменения протеинограммы, чрезвычайно широк, и включает заболевания различной этиологии (воспалительные процессы, связанные с инфекциями, аутоиммунные заболевания, болезни печени, нефротический синдром, дефицит альфа-1-антитрипсина, моноклональные гаммапатии и пр.). Как правило, результат протеинограммы не может служить единственным критерием постановки диагноза. Поскольку в настоящее время существует много более специфичных тестов для диагностики этих заболеваний, наибольшую клиническую значимость исследование белковых фракций представляет в качестве первичного скринингового теста при подозрении на моноклональную гаммапатию, о которой свидетельствует выявление при электрофорезе аномальной фракции (парапротеина).

Парапротеинемия − появление на электрофореграмме дополнительной дискретной полосы, свидетельствующей о присутствии в большом количестве однородного (моноклонального) белка, обычно иммуноглобулинов или отдельных компонентов их молекул, синтезируемых В-лимфоцитами. Высокая концентрация М-белка (больше 15 г/л) с большой вероятностью указывает на миелому. Исследование белковых фракций при подозрении на миелому имеет особую диагностическую ценность .Следует учитывать, что легкие цепи иммуноглобулинов (белок Бенс-Джонса) свободно проходят через сывороточный фильтр и на электрофореграмме сыворотки крови могут не определяться Малые М-белки иногда могут выявляться при хронических гепатитах, доброкачественно − у пациентов престарелого возраста. Имитировать малую парапротеинемию может большая концентрация С-реактивного белка и некоторых других острофазных белков, а также присутствие в сыворотке фибриногена.

С какой целью определяют белковые фракции в сыворотке крови

Электрофорез белков сыворотки крови используют в диагностике состояний, сопровождаемых аномальным синтезом или потерей белка. Скрининговый тест при подозрении на миелому.

1) Кровь следует сдавать натощак, с 8 до 11 часов утра. В течение дня показатели крови могут существенно меняться, результат утреннего анализа — самый достоверный.

2) За 24 часа до теста следует исключить алкоголь и воздержаться от интенсивных физических нагрузок.

3) За 8 часов до взятия крови не следует есть, а также пить соки, молоко или другие напитки. Можно пить негазированную воду. Накануне исследования лучше поужинать лёгкой, нежирной пищей.

4) За 1–2 часа до анализа желательно не курить, избегать стресса и физического напряжения (бег, быстрый подъём по лестнице).

5) За 15 минут до взятия крови желательно немного отдохнуть: посидеть в лабораторном отделении, отдышаться, успокоиться.

Для контроля показателей в динамике следует сдавать анализ в одинаковых условиях: в той же лаборатории, в то же время суток. Женщинам стоит учесть фазу менструального цикла.

• острые или хронические инфекционные заболевания;
• аутоиммунные патологии;
• онкологические заболевания;
• комплексная диагностика множественной миеломы и макроглобулинемии Вальденстрёма;
• диагностика иммунодефицитных состояний.

Повышение значений
Альбумин 

• Обезвоживание, гемоконцентрация.

Фракция альфа-1-глобулинов: 

• Многие острые, подострые и хронические воспалительные процессы.
• Травмы и хирургические вмешательства.
• Опухоли.
• Патология печени.
• Беременность (3-й триместр).
• Прием андрогенов.
• Лимфогранулематоз.

Фракция альфа-2-глобулина: 

• Острые, подострые и хронические воспалительные заболевания.
• Неопластические заболевания.
• Ожоги (стадия восстановления).
• Нефротический синдром.
• Диффузные заболевания соединительной ткани.

Фракция бета-глобулина (при проведении исследования методом капиллярного электрофореза): 

• Моноклональные гаммапатии.
• Прием эстрогенов, железодефицитная анемия (повышение уровня трансферрина).
• Беременность.
• Механическая желтуха.
• Миелома (IgA-тип).
• Нефротический синдром.
• Саркоидоз.

Фракция гамма-глобулина: 

• Хроническая патология печени (хронический активный гепатит, цирроз).
• Хронические инфекции, саркоидоз, паразитарные инвазии.
• Аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.).
• Заболевания, связанные с дискразией или лимфопролиферацией клеток лимфоидной ткани (миелома, лимфома, макроглобулинемия Вальденстрема, амилоидоз и др.).

Понижение значений 

Альбумин: 

• Нарушения питания.
• Синдром мальабсорбции.
• Болезни печени и почек.
• Опухоли.
• Коллагенозы.
• Ожоги.
• Гипергидратация.
• Кровотечения.
• Анальбуминемия.
• Беременность.
• Тяжелые воспалительные заболевания.

Фракция альфа-1-глобулина: 

• Наследственный дефицит альфа-1-антитрипсина.
• Дефицит альфа-1-липопротеина.

Фракция альфа-2-глобулина: 

• Снижение альфа-2-макроглобулина (панкреатит, ожоги, травмы).
• Снижение гаптоглобина (гемолиз различной этиологии, панкреатит, саркоидоз).

Фракция бета-глобулина: 

• Дефицит IgA.

Фракция гамма-глобулина: 

• Иммунодефицитные состояния.
• Прием глюкокортикоидов.
• Плазмаферез.
• Наследственные гипо- и агаммаглобулинемии.